煙草在線據(jù)中國(guó)農(nóng)科院煙草所網(wǎng)站報(bào)道　　為積極追蹤科學(xué)技術(shù)前沿，努力強(qiáng)化團(tuán)隊(duì)成員業(yè)務(wù)水平，8月2日，中國(guó)農(nóng)科院煙草所栽培與調(diào)制創(chuàng)新團(tuán)隊(duì)特邀羅氏生命科學(xué)應(yīng)用技術(shù)部資深工程師傳授“熒光定量PCR實(shí)驗(yàn)技術(shù)”。

　　工程師系統(tǒng)全面地介紹了熒光定量PCR的技術(shù)原理、應(yīng)用領(lǐng)域、操作規(guī)范、分析方法、注意事項(xiàng)及常見問題，針對(duì)團(tuán)隊(duì)研究任務(wù)，就如何做好實(shí)驗(yàn)設(shè)計(jì)、方法選擇、條件優(yōu)化等進(jìn)行了系統(tǒng)講解和互動(dòng)交流，并通過最新發(fā)表的煙草相關(guān)實(shí)驗(yàn)案例分析和現(xiàn)場(chǎng)實(shí)驗(yàn)演示，進(jìn)一步強(qiáng)化大家對(duì)該技術(shù)的理解。

　　大家一致認(rèn)為，本次培訓(xùn)設(shè)計(jì)科學(xué)、深入淺出、針對(duì)性強(qiáng)，使參訓(xùn)人員系統(tǒng)地掌握了熒光定量PCR的基礎(chǔ)技術(shù)，了解了該技術(shù)的應(yīng)用前沿與發(fā)展動(dòng)態(tài)，掌握了實(shí)驗(yàn)條件優(yōu)化方法，規(guī)范了實(shí)驗(yàn)操作，為更好地解決實(shí)驗(yàn)中存在的問題，更準(zhǔn)確地獲得科學(xué)的實(shí)驗(yàn)結(jié)果奠定了良好的基礎(chǔ)。

延伸閱讀

　　熒光定量PCR( realtime fluorescence quantitative PCR，RTFQ PCR) 是1996 年由美國(guó)Applied Biosystems 公司推出的一種新定量試驗(yàn)技術(shù)，該技術(shù)通過熒光染料或熒光標(biāo)記的特異性探針，對(duì)PCR產(chǎn)物進(jìn)行標(biāo)記跟蹤，實(shí)時(shí)在線監(jiān)控反應(yīng)過程，用相應(yīng)軟件可以對(duì)產(chǎn)物進(jìn)行分析，計(jì)算待測(cè)樣品模板的初始濃度。

　　熒光定量PCR技術(shù)以Taqman熒光探針為基礎(chǔ)，Taqman熒光探針為一寡核苷酸，兩端分別標(biāo)記一個(gè)熒光發(fā)射基團(tuán)和一個(gè)熒光淬滅基團(tuán)（常用熒光基團(tuán)是FAM, TET, VIC, HEX）。探針完整時(shí)，發(fā)射基團(tuán)發(fā)射的熒光信號(hào)被淬滅基團(tuán)吸收；PCR擴(kuò)增時(shí)，Taq酶的5’－3’外切酶活性將探針酶切降解，使熒光發(fā)射基團(tuán)和熒光淬滅基團(tuán)分離，從而熒光監(jiān)測(cè)系統(tǒng)可接收到熒光信號(hào)，即每擴(kuò)增一條DNA鏈，就有一個(gè)熒光分子形成，熒光信號(hào)的累積與PCR產(chǎn)物形成完全同步，從而實(shí)現(xiàn)定量。

　　熒光定量PCR的出現(xiàn)，極大地簡(jiǎn)化了定量檢測(cè)的過程，而且真正實(shí)現(xiàn)了絕對(duì)定量。多種檢測(cè)系統(tǒng)的出現(xiàn)，使實(shí)驗(yàn)的選擇性更強(qiáng)。自動(dòng)化操作提高了工作效率，反應(yīng)快速、重復(fù)性好、靈敏度高、特異性強(qiáng)、結(jié)果清晰。隨著生物芯片技術(shù)和熒光探針定量技術(shù)的結(jié)合，熒光定量PCR在各個(gè)領(lǐng)域應(yīng)用前景廣闊。