煙草在線據國家知識產權局網站報道 2014年11月19日,國家知識產權局公開一件由貴州省煙草科學研究院申請的發明專利:一種快速檢測轉基因烤后煙葉的四重PCR引物及方法。
該方法所涉及的引物由煙草內源基因元件NR(硝酸還原酶基因)及外源基因元件(包括35S啟動子、NOS終止子、NPTII篩選標記基因)組成。通過四重PCR擴增,在一次PCR反應中可同時檢測NR基因及3個外源基因,檢測方法包括以下步驟:四對引物稀釋成等摩爾濃度后按1:1:1:1(V/V)比例混合,在20μL反應體系中添加Mg2+1.5mmol/L、dNTP125μmol/L、Taq酶1U、混合引物1μmol/L,DNA100ng,在退火溫度65℃,循環數35個的PCR反應條件下,能夠有效檢測出烤后煙葉百分比含量為0.9%(V/V)的轉基因成分。據稱,該發明的效果是:重復性強、穩定性好、操作簡單、節約成本。
篤行致遠 2024中國煙草行業發展觀察